PHS-3C型精密pH计：上海仪电科学仪器股份有限公司。

然后通过乳和（或）乳制品中蛋白质的凝固过程得到成品。在乳制品热加工过程中，美拉德反应降低了键合到乳糖上的赖氨酸的可用性，进而导致了营养价值降低。

1.2 仪器与设备PL2002电子天平、AL104电子天平梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司。本研究干酪和炼乳样品中均检测到羟甲基糠醛和糠醛2种糠醛类化合物，均未检测到呋喃甲基酮和甲基糠醛，因此本研究主要针对羟甲基糠醛和糠醛进行测定。由于干酪和炼乳的配料和加工工艺均会促进糠醛类化合物的生成，针对再制干酪和炼乳中的糠醛类化合物的研究还很少。ZWY-2102C恒温培养振荡器上海智城分析仪器制造有限公司。后续统一处理步骤为：加入5 m L当日配制0.15 mol/L草酸，100℃水浴加热25 min，冷却至室温。

炼乳主要包括淡炼乳、加糖炼乳和调制炼乳三大类，是以生乳或乳制品为原料，添加或不添加食品添加剂和营养强化剂，经加工制成的黏稠状产品。添加不同辅料的牛乳热加工过程中，随着热处理温度的升高，乳清蛋白变性和凝集、乳糖异构化和降解、美拉德反应等理化反应会依次发生，会导致其中活性成分（如碱性磷酸酶和乳铁蛋白等）减少及化学反应产物（如乳果糖、糠氨酸和糠醛等）增加。（2）DPPH自由基清除能力从图10可以看出，桦剥管菌多糖对DPPH自由基的清除能力随着多糖浓度的增加而逐渐升高，呈现较好的线性关系，但其清除能力低于同等浓度的VC对DPPH自由基的清除能力，浓度在0.125～2mg/mL范围内，桦剥管菌多糖清除羟基自由基的能力从6.32％上升到37.37％，清除能力增加了31.05％。

桦剥管菌多糖浓度大于1mg/mL时对DPPH自由基的清除率可近达到VC对DPPH自由基清除率的50％，即桦剥管菌多糖具有较好的清除DPPH自由基的能力。多糖在料液比大于1:30时下降可能是由于液体过多，稀释了超声波对桦剥管菌粉末的作用，从而导致多糖得率下降。4、桦剥管菌多糖体外抗氧化活性研究（1）羟基自由基清除能力从图9可以看出，桦剥管菌多糖对羟基自由基的清除能力随着多糖浓度的增加而逐渐增加，呈现较好的量效关系，浓度在0.125～8mg/mL范围内，桦剥管菌多糖清除羟基自由基的能力从8.26％上升到57.39％，清除能力增加了49.13％。根据实际情况，在水浴温度69℃，超声功率80W，液料比为30:1(其他条件：水浴时间1h，超声温度70℃，超声时间20min)的条件下重复3次，得到桦剥管菌多糖得率为10.130.14，实际测定值与理论值相接近，说明该拟合模型与实际情况拟合良好。

C.V.=4.91％，此值越小，表明实验值越可靠。因此，所选用的二次回归模型成立，可用于预测不同条件下桦剥管菌多糖的得率。

体外抗氧化实验结果表明：桦剥管菌多糖浓度在8mg/mL时，清除羟基自由基的能力为57.39％。其清除能力低于同等浓度的VC对羟基自由基的清除能力，桦剥管菌多糖在8mg/mL时对羟基自由基的清除率与VC在0.5mg/mL时的清除率相当，即桦剥管菌多糖具有较好的清除羟基自由基的能力。本文得率虽较少，但降低了生产成本，具有较好的应用前景。由方差分析表5的分析结果可见：P模拟=0.0018＜0.01，表明该二项模型显著。

三、结论本实验在单因素实验基础上，采用响应面法优化超声辅助桦剥管菌多糖提取工艺：水浴时间lh，水浴温度69.16℃，超声温度70℃，超声时间20min，超声功率80.24W，液料比为30:1，提取3次，利用此工艺多糖得率为10.228％。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：羟基自由基，多糖，DPPH。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。R2=0.9385，表明有93.85％的可能性可以由这个拟合模型来表示。

3、响应面实验设计优化提取参数（1）响应面实验结果及方差分析采用Design-Expert.V8.0.6软件，对桦剥管菌多糖得率的响应面实验条件设计及结果见表4。（3）超声辅提桦剥管菌多糖最佳工艺参数确定由DesignExpert.V8.0.6软件分析，超声辅提桦剥管菌多糖的最佳提取条件：水浴温度69.16℃，超声功率80.24W，液料比为30:1，回归方程预测值为10.228％。

因此选择料液比1:20、1:30、1:40进行响应面优化实验分析。由各因素一次项的F值可知：影响桦剥管菌多糖得率的大小顺序：水浴温度＞超声功率＞液料比。

R2adj=0.8595，表明只有14.05％的可能性不符合这个拟合模型。根据各因素对实验结果的影响进行二次回归模型的拟合，拟合后得到下式：Y=9.37+1.04A-0.33B+0.10C+0.27AB+0.26AC+0.16BC-0.79A2-1.14B2+0.22C2其中，Y表示桦剥管菌多糖得率，A、B、C分别是水浴温度、超声功率、液料比的编码。桦剥管菌多糖浓度在2mg/mL时，清除DPPH自由基的能力为37.37％，具有较好的抗氧化能力。（5）料液比对桦剥管菌多糖得率的影响从图7可以看出，料液比在1:10时多糖得率最低，可能是因为液体过少，料液黏稠不利于超声波空化效应的产生，也不利于多糖从样品中的流出，导致多糖得率很低。P失拟项=0.2422＞0.05，表明这一项不显著，实验以外的他因对本实验的影响小。（2）响应面各因素交互作用分析从图8可见，图8a响应面坡度最大(A与B交互)，其次是图8c(A与c交互)，图8b(B与C交互)，水浴温度与超声功率对桦剥管菌多糖的提取影响较大

空白组的多糖溶液由95％乙醇溶液代替。（4）超声功率对桦剥管菌多糖得率的影响从图6可以看出，超声功率在60～100W的范围内，桦剥管菌多糖得率变化较明显，当超声功率在80W时，其多糖得率达到相对最大值，超声功率也是影响多糖得率的因素之一，多糖得率在超声功率为90W时下降可能是由于超声波过强的剪切力和冲击波对多糖分子有所破坏，导致多糖得率有所降低。

因此选择超声功率70、80、90W进行响应面优化实验分析。将反应体系混匀，在室温下静置30min，在517nm处测定各反应液的吸光值。

（2）超声温度对桦剥管菌多糖得率的影响从图4可以看出，桦剥管菌多糖得率随着超声温度的升高，呈现出先升后降的趋势，超声温度在70℃时，多糖得率最大，为7.28％，但与其他超声温度影响下的多糖得率相差不大，因此不选择超声温度进行后续的响应面优化实验分析。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：自由基，乙醇，葡萄糖。

分别精确配制0.125mg/mL、0.25mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、1.5mg/mL、2.0mg/mL样品多糖溶液，用95％乙醇溶液配制0.2mmol/LDPPH溶液，依次在反应体系中加入2.0mLDPPH乙醇溶液(0.2mmol/L)和2.0mL不同浓度的多糖溶液。（7）DPPH自由基清除力测定根据DPPH与乙醇溶液显色，当有抗氧化剂存在时，使DPPH乙醇溶液颜色消退，从而导致吸光强度发生改变的方法测定DPPH自由基清除能力。（3）超声时间对桦剥管菌多糖得率的影响从图5可以看出，超声时间在10～30min范围内时，随着超声时间的增加，桦剥管菌多糖得率为6.24％～6.99％，变化不明显，与其他因素相比较，超声时间影响较小，因此不选择超声时间进行响应面优化实验分析。按照下式计算DPPH自由基的清除率。

DPPH自由基清除率(％)=(Ao-A)/Ao100％，其中，Ao：空白组的吸光值。但当温度过高时，又会破坏多糖成分，引起多糖降解，从而导致提取率的下降。

参照Sun等的实验方法并做适当修改。因此选择水浴温度60、70、80℃进行响应面优化实验分析。

对照组用同等浓度的VC溶液代替多糖溶液。当温度较低时，多糖的溶解与渗透能力较低，桦剥管菌多糖不易有效溶出。

当温度较高时，高温崩解细胞并增强分子热运动，促使部分多糖链降解更易溶出。二、结果与分析1、葡萄糖标准曲线的建立以葡萄糖含量为横坐标，对应吸光值为纵坐标，建立标准曲线，得到线性标准曲线回归方程(如图2)：2、桦剥管菌多糖提取的单因素实验（1）水浴温度对桦剥管菌多糖得率的影响从图3可以看出，水浴温度在40℃～70℃范围内时，随着水浴温度的增高，桦剥管菌多糖得率不断增加，当水浴温度达到70℃时，多糖得率最大，在水浴温度进一步增高时，多糖得率有所降低。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有m是桦剥管菌子实体粉末质量。

（3）桦剥管菌多糖含量及得率的测定采用苯酚-硫酸法进行桦剥管菌多糖含量的测定。桦剥管菌多糖是桦剥管菌的主要活性成分之一，具有消炎、抑菌的功能，同时，桦剥管菌多糖具有二抗作用，即抗病毒和抗癌作用。

一、材料与方法1、材料与试剂桦剥管菌子实体干品，2017年11月购于延边华夏桑黄菌业有限公司。再将多糖浓度带入以下公式，计算桦剥管菌多糖得率：桦剥管菌子实体多糖得率(％)=CVn/m100％，其中，C是测得吸光度对应的浓度。

桦剥管菌分布地区广泛，陕西、福建、安徽、黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、甘肃、四川、云南、贵州、新疆、西藏、河南、湖南等地区。其形态特征：子实体中大型(最大直径可达30cm)，无柄或几乎无柄，上部为扁半球形，下部为扁平形，生长初期为污白褐色，后期为褐色。